Beschreibung*
Quantitative Bestimmung von Methotrexat im Plasma mittels Chemilumineszenz-Mikropartikelimmunoassay (CMIA)
Ziel und Zweck der Untersuchung
Methotrexat (454 Da) ist ein Analogon der Folsäure (Vitamin B6) und inhibiert daher als Antimetabolit reversibel das Enzym Dihydrofolat-Reduktase. Dadurch wirkt diese Substanz zytostatisch bzw. antineoplastisch. Methotrexat wird allein oder in Kombination mit anderen antineoplastischen Substanzen zur Behandlung von Leukämien (v. a. akute lymphatische Leukämie), osteogenem Sarkom, Non-Hodgkin-Lymphomen, Lungen- sowie Brustkrebs eingesetzt. WESENTLICH GERINGERE Methotrexat-Dosen werden zur Behandlung von Autoimmunerkrankungen wie schwerer Psoriasis, Asthma, rheumatoider Arthritis, Sarcoidose sowie bei der Immunsuppression nach Transplantationen eingesetzt.
Prinzip des Verfahrens
ARCHITECT Methotrexat ist ein Ein-Schritt-Immunoassay zur quantitativen Bestimmung von Methotrexat in Humanplasma und beruht auf der CMIA-Technik mit flexiblen Assayprotokollen, die als Chemiflex bezeichnet wird. Die Probe, die mit anti-Methotrexat beschichteten paramagnetischen Mikropartikel, das assayspezifische Verdünnungsmittel und das Methotrexat:akridiniummarkierte Konjugat werden gemischt und bilden das Reaktionsgemisch. Die mit anti-Methotrexat beschichteten Mikropartikel binden an das in der Probe vorhandene Methotrexat und an das Methotrexat:akridiniummarkierte Konjugat. Nach dem Waschen werden dem Reaktionsgemisch Pre-Triggerlösung und Triggerlösung zugegeben. Die resultierende Chemilumineszenzreaktion wird in relativen Lichteinheiten (RLE) gemessen. Die Methotrexat-Menge in der Probe ist umgekehrt proportional zu den vom optischen System des ARCHITECT i Systems gemessenen RLE.
Literatur
Beipack Hersteller
Ergebniseinheit
µmol/l
Einheiten(sonstige)
keine
Synonyme
MTX
Analysenfrequenz
nach Bedarf
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
2 Tage
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
Li-Heparin-Plasma
Sammelperiode
nicht zutreffend
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
1 ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Lithium-Heparin Monovette
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige)
keine
Spezielle Präanalytik - Probentransport
Intern: Rohrpost Extern: Lichtschutz erforderlich (s.verlinkte Literatur, Seite 745)
Messbereich
0,040 - 1,500 µmol/l
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Messungen von Proben, die humanen Anti-Maus-Antikörper(HAMA) enthalten, können zu Interferenzen führen. Eine Messung mit diesem Assay ist dann laut Hersteller nicht möglich. Für Proben mit Bilirubin <60 mg/dl , Cholesterin <700 mg/dl, Hämoglobin <1000 mg/dl, Gesamteiweiß <12 g/dl, Rheumafaktor <1500 kU/l, Triglyceride <3000 mg/dl und Harnsäure <30 mg/dl beträgt der Bias bis zu +/- 8% zu nicht angereicherten Proben.
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
Proben von Patienten, denen zur Therapie einer Methotrexat-Überdosierung Glucarpidase (Carboxypeptidase G2) verabreicht wurde, sollten frühestens 48 Stunden nach der letzten Glukarpidase-Dosis mit dem ARCHITECT Methotrexate Assay untersucht werden. Diese Proben enthalten erhöhte Konzentrationen an 4-[[2,4-Diamino-6- (pteridinyl)methyl]-methylamino]-Benzoesäure (DAMPA), die aus dem Stoffwechsel von Methotrexat durch Glucarpidase resultieren.DAMPA kreuzreagiert mit dem in diesem Assay verwendeten Methotrexat-Antikörper. Onkologen des klinischen Teams sollten das Labor verständigen, wenn Glucarpidase verabreicht wird. Aminopterin ist ein Derivat von Folsäure und kreuzreagiert mit dem in diesem Assay verwendeten Methotrexat-Antikörper.
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
CE-IVD Zertifikat laut Beipack (2009-02)
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