Parameterdetails

Parametername: Cytochrom P450 Isoenzym 3A5 Genotypisierung

Version: 1 Gültig ab 28.03.2018

Beschreibung* Genotypisierung der Cytochrom P450 Isoenzymvarianten 3A5*2 (G6986A) und 3A5*3 (C1193A) aus Vollblut mittels PCR und RFLP.

Ziel und Zweck der Untersuchung Das untersuchte Gen codiert für das Cytochrom P450 Iso-Enzym CYP3A5, eines der wichtigsten Enzyme der Cytochrom P450-Enzymfamilie. Über CYP3A5 werden unter anderem endogene Steroide, exogene Toxine und eine Vielzahl von Medikamenten – wie bspw das Immunsuppressivum Tacrolimus verstoffwechselt. Polymorphismen im CYP3A5-Gen können zu einer erniedrigten Enzymaktivität und Substrat-Metabolisierung führen und in der Folge eine Dosisanpassung notwendig machen.
Der bei ca. 80% der Kaukasier verbreitete homozygote Polymorphismus CYP3A5*3 (G6986A) bewirkt einen vorzeitigen Abbruch in der CYP3A5-Proteinsynthese und führt in der Folge zu einer sehr geringen Enzymaktivität, während bei Vorliegen von bereits einem Wildtyp-Allel (bei ca. 15%) eine bis zu dreifach höhere CYP3A5 Aktivität vorhanden ist. Da der homozygote Genotyp bei Kaukasiern sehr häufig vorkommt, wird in der Regel von einer geringeren CYP3A Aktivität ausgegangen. Patienten mit mindestens einem Wildtyp-Allel benötigen hingegen höhere Dosen von Medikamenten (zB Tacrolimus) für eine adequate Wirkung; andernfalls kann durch die Standarddosierung nicht der gewünschte immunsuppressive Effekt erzielt werden. Ähnliches gilt für den Polymorphismus CYP3A5*2, der durch den Austausch von C1193A bedingt ist und bei ca. 2% der kaukasischen Bevölkerung auftritt.
Die CYP3A5-Genotypisierung ist indiziert bei Patienten vor Beginn einer Therapie mit Tacrolimus zur schnelleren Erreichung eines stabilen Wirkstoff-Spiegels und Vermeidung einer Überdosierung (Risiko der Nephrotoxizität) oder Unterdosierung (Risiko der akuten Transplantatabstoßung) sowie bei Patienten mit unerwünschten Wirkungen unter Tacrolimus-Therapie.

Prinzip des Verfahrens In einem ersten Schritt erfolgt die Isolierung genomischer DNA aus dem Untersuchungsmaterial. Nach Amplifikation der Nukleinsäure in zwei verschiedenen PCR-Reaktionen erfolgt ein Verdau mit spezifischen Restriktionsendonukleasen. Die Genotypisierung erfolgt nach dem Prinzip der Restriktionsfragmentlängenpolymorphismus-(RFLP) Analyse in einem Kapillarelektrophoresesystem.

Literatur - Van Schaik et al. CYP3A5 variant allele frequencies in Dutch Caucasians. Clin Chem. 2002 Oct;48(10):1668-71.
- Ekbal et al. Pharmacogenetics of immunosuppressive drugs: prospect of individual therapy for transplant patients. Pharmacogenomics. 2008 May;9(5):585-96.
- Becquemont et al. Practical recommendations for pharmacogenomics-based prescription: 2010 ESF-UB Conference on Pharmacogenetics and Pharmacogenomics. Pharmacogenomics. 2011 Jan;12(1):113-24.

Ergebniseinheit

Einheiten(sonstige) qualitative Analyse

Synonyme CYP3A5 Genotypisierung
Pharmakogenetik
Tacrolimus-Therapie
Tacrolimus-Response
Arzneimittelnebenwirkung
Toxizität
Immunsuppression

Analysenfrequenz 1x wöchentlich

Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage) 72 Stunden

Spezimen
(Plasma, Serum, Harn) EDTA-Vollblut

Sammelperiode nicht zutreffend

Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation) 1 ml

Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe K-EDTA Monovette

Spezielle Präanalytik - Probentransport Für die CYP3A5-Genotypisierung ist derzeit keine Einverständniserklärung erforderlich.
Probenanlieferung bei 2-8°C, nicht frieren, nicht aliquotieren. Keine Annahme von Sekundärröhrchen! Laut Beschluss der österreichischen Genttechnikkommission vom 4.12.2009 gilt für pharmakogenetische Untersuchungen folgende Regelung: Sollte ein im Zuge einer pharmakogenetischen Untersuchung analysierter Polymorphismus auch Aussagen i.S.d. §65 Abs.1 Z3 und 4 GTG über die Veranlagung für eine möglicherweise künftig ausbrechende genetisch bedingte Erkrankung zulassen, so ist die Untersuchung dieses Polymorphismus antragspflichtig i.S.d. §68 Abs.2 GTG.

Messbereich Wildtyp, heterozygot, homozygot

Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie) •Heparin als Antikoagulans
•Unzureichende Qualität und/oder Quantität des Probenmaterials

Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch) nicht zutreffend

Ausdruck gültig am 10.12.2018

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