Beschreibung*
Quantitative Bestimmung der Tartrat-resistenten sauren Phosphatase (TRAP-Isoform 5b) in humanem Serum mittels ELISA
Ziel und Zweck der Untersuchung
Große Mengen der Tartrat-resistenten sauren Phosphatase (TRAP bzw. TRACP) werden von knochenresorbierenden Osteoklasten und aktivierten Makrophagen exprimiert. Im menschlichen Blut zirkulieren zwei Formen der TRAP, definiert als TRAP 5a und TRAP 5b. Die TRAP5b stammt von Osteoklasten, die TRAP5a von Makrophagen. Während Kollagenfragmente (z.B.beta-crosslaps) die resorptive Aktivität von Osteoklasten auf indirektem Weg widerspiegeln, gilt das Isoenzym 5b der Tartrat-resistenten sauren Phosphatse (TRAP-5b) als direktes Synthese-produkt. Crosslaps und TRAP-5b gelten somit als Knochenresorptionsmarker, während Osteocalcin, BAP und P1NP als Knochenanbaumarker definiert sind. Der im ZIMCL eingesetzte Test ist eine spezifische Methode zur Bestimmung der unmittelbar von den Osteoklasten freigesetzten TRAP5b-Aktivität und dient zur Ermittlung einer erhöhten Knochenresorptionsrate bei Patienten mit primärer Osteoporose und renal bedingter Knochenerkrankung. Die Bestimmung von TRAP5b kann weiters beim Monitoring der Effizienz antiresorptiver Therapien hilfreich sein.
Prinzip des Verfahrens
-Mit monoklonalem Anti-TRAP-Antikörper beschichtete Mikrotiterplatte, Zugabe von TRAP-Standards, Positivkontrolle und Patientenproben. -Zusatz von Freisetzungsreagenz, welches zur Ablösung von aktivem TRAP5b von den Bindungsproteinen erforderlich ist. -Bindung von freigesetztem TRAP5b an den Anti-TRAP Antikörper. -Inkubation mit pNPP-Substrat, Stoppen der Enzym-Substratreaktion mit NaOH und photo-metrische Quantifizierung.
Literatur
Biomarker in der Osteologie/Bieglmayer-Kudlacek Packungsbeilage
Ergebniseinheit
U/l
Einheiten(sonstige)
nicht zutreffend
Synonyme
Tartratresistente saure Phosphatase TRAP5b Bone-TRAP
Analysenfrequenz
1-2x monatlich
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
3 Tage, sofern die Proben bei 2-8 °C gelagert werden.
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
Serum
Sammelperiode
nicht zutreffend
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
1 ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Serum Monovette
Spezielle Präanalytik - Probentransport
INTERN: Transport über Rohrpost EXTERN: Die abgeserte Probe gekühlt (2-8°C) versenden! Achtung: Bei Follow-up Untersuchungen ist immer derselbe Probentyp zu verwenden.
Messbereich
0,5 – 10 U/l
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Hohe Hämoglobinkonzentrationen beeinflussen die Testergebnisse nicht. Hohe Lipidkonzentrationen können zu niedrigeren OD-Werten führen, wodurch die Ergebnisse verfälscht werden (Herstellerseitig jedoch keine Konzentrationsangaben zu Lipiden)
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
Keine Interferenz mit TRAP5a oder anderen Phosphatasen.
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
CE-IVD Zertifikat
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