Beschreibung*
Quantitative Bestimmung von Adiponectin in humanem Serum mittels ELISA
Ziel und Zweck der Untersuchung
Adiponectin, auch bezeichnet als Acrp30, ADIPOQ und GBP-28, ist ein 244 Aminosäuren großes Protein, welches überwiegend in Fettzellen exprimiert wird. Es gehört zur solublen Kollagen-Superfamilie und ist strukturell dem Kollagen VIII sowie Komplementfaktor C1q ähnlich. Adiponektin zirkuliert in höhergradigen Komplexen im Serum, seine Rezeptoren werden v.a. im Skelettmuskel (AdipoR1) bzw. in der Leber (AdipoR2) exprimiert. Adiponectin steigert die Empfindlichkeit der Fettzellen für Insulin und verringert die Plasmaglukose-Konzentration durch Steigerung der Fettoxidation. Die Produktion von Adiponectin erfolgt vermehrt in leeren Fettzellen, während sie in vollen Fettzellen reduziert ist. So verhält sich Adiponectin umgekehrt proportional zu Fettgewebsmasse, Glukose, Insulin, Triglyceriden, Leberfettgehalt und Body-Mass-Index. Eine direkte Korrelation besteht hingegen für HDL-Cholesterin, Leberinsulinempfindlichkeit und Insulin-stimulierter Glucoseverwertung. Klinische Studien haben gezeigt, dass niedrige Adiponectin Spiegel mit Insulinresistenz assoziiert sind und dem Auftreten von Typ 2-Diabetes vorausgehen. Diabetes-Patienten (insbesondere bei schlechter medikamentöser Einstellung oder gleichzeitig vorliegener KHK) weisen verminderte Adiponektin Konzentrationen auf. Adiponectin hemmt weiters atheriosklerotisch bedingte Entzündungsprozesse durch Hemmung der Makrophagen und verminderte Expression von Adhäsionsmolekülen und Zytokinen in vaskulären Endothelzellen. Es spielt eine Rolle beim myokardialen Remodeling nach kardialer Ischämie und fördert die Angiogenese, weshalb ein Mangel an Adiponectin zu Gefäßschädigungen führt (diabetische Vaskulopathie). So sind niedrige Adiponectin Spiegel auch bei Patienten mit koronarer Herzkrankheit beschrieben, während erhöhte Werte mit einem vermindertem Herzinfarktrisiko assoziiert sind. Schließlich gehen erhöhte Adiponectin Spiegel mit einem erhöhten Risiko für Demenz einher. Zusammenfassend stellt Adiponectin ein möglicher Marker Fettleibigkeit, Insulinresistenz, Hyperlipidämie und Atherosklerose dar.
Prinzip des Verfahrens
Der im ZIMCL eingesetzte ELISA ist ein kompetitiver Enzymimmunoassay zur direkten quantitativen Bestimmung von Adiponectin. In den mit rekombinantem Adiponectin beschichteten Mikrotiterstreifen werden die Proben, Kontrollen und die Standards mit Peroxidase-markierten Anti-Adiponectin Antikörpern gemischt. Das unmarkierte Antigen (Adiponectin in der Patientenprobe) verdrängt einen Teil der Peroxidase-gebundenen Antikörper von den Bindungsstellen am gebundenen Adiponectin-Antigen. Durch einen Waschschritt werden die freien von den gebundenen Antigenen getrennt. Die nach der anschließenden TMB Substratreaktion bei 450 nm gemessene optische Dichte (OD) ist umgekehrt proportional zur Adiponectin-Konzentration. Die unbekannten Proben werden anhand einer Standardkurve ausgewertet.
Literatur
Zhu et al. Vascular effects of adiponectin: molecular mechanisms and potential therapeutic intervention. Clin Sci (Lond). 2008 Mar;114(5):361-74. Takemura et al. Adiponectin and cardiovascular inflammatory responses. Curr Atheroscler Rep. 2007 Sep;9(3):238-43. Kadowaki et al. The physiological and pathophysiological role of adiponectin and adiponectin receptors in the peripheral tissues and CNS. FEBS Lett. 2008 Jan 9;582(1):74-80. van Himbergen et al. Biomarkers for insulin resistance and inflammation and the risk for all-cause dementia and alzheimer disease: results from the Framingham Heart Study. Arch Neurol. 2012 May;69(5):594-600. Gelsinger et al. Adipokine update – neue Moleküle, neue Funktionen. Wiener Medizinische Wochenschrift. August 2010, Volume 160, Issue 15, pp 377-390.
Ergebniseinheit
µg/l
Einheiten(sonstige)
µg/l
Synonyme
Acrp30, AdipoQ, GBP-28
Analysenfrequenz
wöchentlich
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
5 Tage
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
Serum
Sammelperiode
nicht zutreffend
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
1 ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Serum Monovette
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige)
nicht zutreffend
Spezielle Präanalytik - Probentransport
interne Einsender: Venenpunktion, rascher Transport mit Rohrpost. externe Einsender: Venenpunktion, Probenzentrifugation, abseren, gekühlt und am gleichen Tag versenden.
Messbereich
1000 -100000 µg/L (1-100µg/ml)
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Keine Störung lt. Hersteller bis Hämoglobin 1.0 mg/ml, Bilirubin 170 umol/l und Triglyceride 5.0 mmol/l.
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
Keine Kreuzreaktivität beschrieben für humanes Leptin, Leptin Rezeptor oder Resistin bis zumindest 100 ng/ml lt. Hersteller.
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
CE-IVD zertifiziert
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