Beschreibung*
Quantitative Bestimmung von Inhibin B in humanem Serum mittels ELISA
Ziel und Zweck der Untersuchung
Inhibin ist ein heterodimeres Polypeptid-Hormon, das als Proteohormon in den Sertolizellen der Hoden sowie in den Granulosazellen der Eierstöcke gebildet wird. Inhibin reguliert die Gametogenese über eine Hemmung der FSH-Freisetzung in der Hypophyse, während umgekehrt die Ausschüttung von FSH als negatives Feedback die Sekretion von Inhibin stimuliert. Das 32 bis 36 kD große Glykoprotein Inhibin setzt aus zwei über Disulfid-Brücken verbundenen Eiweißketten (eine alpha und zwei mögliche beta Ketten) zusammen, wobei je nach Zusammensetzung der verschiedenen Beta-Ketten unterschiedliche Inhibine entstehen: Inhibin A aus Alpha- und Beta-A-Kette, Inhibin B aus Alpha- und Beta-B-Kette sowie Activin, wenn sich zwei beta-Ketten aneinander lagern. Die letztgenannte Form wirkt jedoch stimulierend auf die FSH Freisetzung in der Hypophyse. Inhibin B ist ein möglicher endokriner Marker für die Überwachung der weiblichen gonadalen Funktion zB im Rahmen einer Fertilitästherapie. Außerdem ist es bei Männern in Kombination mit LH und FSH geeignet für die Überwachung der männlichen gonadalen Funktion nach Bestrahlungs-induzierter Schädigung der Sertolizellen. Schließlich hat Inhibin B als Tumormarker eine hohe Sensitivität und Spezifität für Granulosazeltumoren bei postmenopausalen Frauen nach beidseitiger Ovarektomie.
Prinzip des Verfahrens
Sandwich-ELISA. Kalibratoren, Kontrollen und Proben werden in einer mit anti-Activin B beschichteten Mikrotiterplatte inkubiert. Nach einem Waschschritt wird ein Biotin markierter anti-Inhibin-Detektionsantikörper hinzugegeben. Nach einem zweiten Waschschritt wird Streptavidin-Meerrettichperoxidase (HRP) hinzupippetiert. Nach einem dritte Waschschritt wird ein Tetramethylbenzidin (TMB) Substrat hinzugefügt und mit einer Stopplösung versetzt. Anschließend erfolgt die Absorptionsmessung bei 450 und 630nm. Die gemessene Absorption ist direkt proportional zur Inhibin-B Konzentration in der Probe. Die Konzentration der Probe wird anhand einer Kalibrationskurve berechnet.
Literatur
Pierik et al. Serum inhibin B as a marker of spermatogenesis. J Clin Endocrinol Metab 1998.83:3110-3114. Anawalt et al. Serum inhibin B levels reflect Sertoli cell function in normal men and men with testicular dysfunction. J Clin Endocrinol Metab 1996. 81:3341-3345. Lockwood et al. Inhibins and activins in human ovulation, conception and pregnancy. Hum Reprod Update 1998. 4:284-295. Dzik et al. Inhibin B response to EFORT is associated with the outcome of oocyte retrieval in the subsequent in vitro fertilization cycle. Fertil Steril 2000. 74:1114-1117. Danforth et al. Dimeric inhibin: a direct marker of ovarian aging. Fertil Steril 1998. 70:119-123.
Ergebniseinheit
ng/l
Einheiten(sonstige)
pg/ml
Synonyme
Follikulostatin
Analysenfrequenz
1x/ Monat
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
< 48 h
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
Serum
Sammelperiode
nicht zutreffend
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
1 ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Serum Monovette
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige)
Lithium - Heparin Monovette
Spezielle Präanalytik - Probentransport
Interne Einsender: Venenpunktion und rascher Transport ins Labor mit Rohrpost. Externe Einsender: Venenpunktion, abgeserte Proben gekühlt innerhalb von 48 Stunden, ansonsten tiefgefroren verschicken.
Messbereich
7,25 - 1000 ng/l
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Hb, Triglyzeride und Bilirubin bis zum Zweifachen des physiologischen Bereichs führen gemäß Hersteller zu keiner Test-Interferenz.
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
Keine Kreuzreaktivität bis zum Zweifachen des physiologischen Bereichs für Inhibin A, Activin A, Activin B, Activin AB, AMH, FSH, LH oder Follistatin gemäß Hersteller.
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
CE-IVD zertifiziert
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