Beschreibung*
Quantifizierung eines Inhibitors gegen Faktor VIII in Bethesda-Einheiten (BU) in Citratplasma unter laufender Therapie mit Emicizumab mittels bovin-chromogenen FVIII Assay
Ziel und Zweck der Untersuchung
Unter laufender Therapie mit Emicizumab kann der Bethesda-Assay – ebenso wie die Bestimmung der endogenen FVIII-Aktivität – ausschließlich mittels chromogenem Testverfahren unter Verwendung boviner Reagenzien durchgeführt werden, da diese Emicizumab nicht erfassen. Bei Patienten mit Hämophilie A unter Emicizumab sollte der FVIII-Inhibitor in regelmäßigen Abständen bestimmt werden. Auch bei Patienten mit erworbener Hämophilie A, die mit Emicizumab behandelt werden, kann die Inhibitordiagnostik auf diese Weise erfolgen, um den Verlauf des Inhibitors zu überwachen.
Prinzip des Verfahrens
Eine Verdünnungsreihe des Patientenplasmas wird mit einer Faktor-VIII-Quelle versetzt und nach zweistündiger Inkubation der Faktor-VIII-Restgehalt bezogen auf die mitgeführte Kontrollmischung in Prozent angegeben. Der so erhaltene Wert wird an einer halblogarithmisch aufgetragenen Bezugsgerade unter Berücksichtigung des jeweiligen Verdünnungsfaktors dem Inhibitortiter in BU/ml zugeordnet. Eine Bethesda-Einheit entspricht definitionsgemäß einer Inhibitormenge, die die Faktor-VIII-Aktivität eines Normalplasmapools exakt halbiert. Die Endpunktmessung erfolgt wie erwähnt mittels bovin-chromogenem FVIII Assay.
Literatur
Tripodi A, Chantarangkul V, Novembrino C, Scalambrino E, Boscolo-Anzoletti M, Clerici M, Rossi F, Peyvandi F. Emicizumab, the factor VIII mimetic bi-specific monoclonal antibody and its measurement in plasma. Clin Chem Lab Med. 2020 Sep 4;59(2):365-371. doi: 10.1515/cclm-2020-0696. PMID: 32892172.
Ergebniseinheit
Einheiten(sonstige)
Bethesda-Einheiten/ml (BE/ml)
Synonyme
Faktor-VIII-Inhibitor, Bethesda Assay unter Emicizumab
Analysenfrequenz
bei Bedarf
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
4 Stunden (bei ausreichender Probenmenge)
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
Citratplasma
Sammelperiode
nicht zutreffend
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
2 Citratröhrchen (3ml Sarstedt)
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Citrat (3.13% 0.106 mol/L Natriumcitrat) Monovette
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige)
nicht zutreffend
Spezielle Präanalytik - Probentransport
Das Citratröhrchen muss bis zur Füllmarke befüllt sein und unmittelbar nach der Abnahme vorsichtig geschwenkt werden.
Messbereich
> 0,4
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Theoretisch könnten Inhibitoren gegen Thrombin (auch therapeutische wie Dabigatran), FXa (auch therapeutische wie Rivaroxaban oder Heparine), bzw. FX-Hemmkörper oder FIX-Hemmkörper den Test stören. Therapeutische Thrombin/Xa-Inhibitoren werden ausgeschlossen, da bei jeder Bethesda Bestimmung auch die AntiFXa-Aktivität und Thrombinzeit mit bestimmt werden.
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
nicht zutreffend
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
siehe CE-Liste und Packungsbeilage
