Parameterdetails

Parametername: Hämoglobinopathie/Thalassämie Genotypisierung

Version: 1 Gültig ab 29.04.2026

Beschreibung* Sequenzanalyse der Gene HBA1, HBA2 und HBB mittels massiv paralleler Sequenzierung und PCR aus isolierter genomischer DNA

Ziel und Zweck der Untersuchung Hämoglobinopathien und Thalassämien zählen weltweit zu den häufigsten monogenen Erkrankungen und treten insbesondere in Regionen mit historischer Malariaexposition (Mittelmeerraum, Afrika, Naher Osten, Süd‑ und Südostasien) gehäuft auf.
Sie sind durch quantitative (Thalassämien) oder qualitative (z. B. Sichelzellkrankheit) Störungen der Hämoglobinsynthese gekennzeichnet und können klinisch von asymptomatischen Trägerzuständen bis zu schweren, transfusionspflichtigen Anämien reichen.
Bei Verdacht auf eine Hämoglobinopathie empfiehlt sich eine stufenweise Diagnostik mit initialer hämatologischer Basisabklärung (Blutbild, Eisenstatus), gefolgt von proteinanalytischen Verfahren (Hb‑Kapillarelektrophorese/HPLC) und bei unklaren oder auffälligen Befunden eine anschließende molekulargenetische Untersuchung.
Mit dem eingesetzten Verfahren (Gensequenzanalyse der Gene HBA1, HBA2 und HBB und sondenbasierter Hybridisierungsassay) können molekulargenetisch uneindeutige Befunde, strukturelle Hämoglobinvarianten sowie Alpha/Beta‑Thalassämien weiter abgeklärt werden. Neben dem Nachweis von Punktmutationen und kleinen Deletionen werden die häufigsten großen Deletionen im HBA1 und HBA2 Gen erfasst. Die molekulare Diagnostik ermöglicht damit eine ergänzende präzise Genotyp‑Phänotyp‑Korrelation, da proteinbasierte Methoden nicht alle klinisch relevanten Varianten zuverlässig abbilden.

Prinzip des Verfahrens 1. Massiv parallele Sequenzierung:
Sequenzanalyse der og. Gene mittels NGS nach DNA‑Fragmentierung, Adapterligierung und gezielter Anreicherung. Die Sequenzdaten werden bioinformatisch gegen eine Referenz ausgewertet und zur Identifikation pathogener Sequenzvarianten einschließlich Punktmutationen und kleiner Insertionen/Deletionen herangezogen.

2. Sondenbasierter Hybridisierungsassay:
PCR‑basiertes Verfahren mit nachgeschalteter reverser Hybridisierung zur Detektion definierter Varianten in den Genen HBA1 und HBA2. Biotinylierte Amplifikationsprodukte hybridisieren an immobilisierte allelspezifische Oligonukleotidsonden, die anschließend enzymatisch über ein Streptavidin‑Alkalische‑Phosphatase‑System visualisiert werden.

Literatur 1.Bain BJ. Haemoglobinopathy Diagnosis. 3rd ed.: Wiley Blackwell; 2020
2.Taylor SM et al. Haemoglobinopathies and the cli nical epidemiology of malaria: a sys-tematic review and meta-analysis. Lancet Infect Dis 2012; 12(6): 457– 468. https://doi.org/10.1016/S1473-3099(12)70055-5
3.Taher AT et al. Thalassaemia. Lancet 2018; 391(10116): 155–167. https://doi.org/10.1016/S0140- 6736(17)31822-6
4.Williams TN, Weatherall DJ. World distribution, population genetics, and health burden of the hemoglobinopathies. Cold Spring Harb Perspect Med. 2012;2(9):a011692. Published 2012 Sep 1. doi:10.1101/cshperspect.a011692
5.Piel FB und Weatherall DJ. The α-thalassemias. N Engl J Med 2014; 371(20): 1908–1916. https://doi. org/10.1056/NEJMra1404415
6.Taher AT et al. beta-Thalassemias. N Engl J Med 2021; 384(8): 727–743. https://doi.org/10.1056/ NEJMra2021838
7.Ware RE et al. Sickle cell disease. Lancet. 2017; 390(10091): 311–323. https://doi.org/10.1016/S0140- 6736(17)30193-9
8. Uhlen M, Quake SR. Sequential Sequencing by Synthesis and the Next-Generation Sequencing Revolution. Trends in Biotechnology. 2023.

Ergebniseinheit

Einheiten(sonstige) Qualitative Analyse; zu erwartende Ergebnisse: Nachweis / kein Nachweis von SNV/InDels/CNVs in den untersuchten Gen-Regionen

Synonyme Hämoglobinopathie
Thalassämie
Sichelzellkrankheit

Analysenfrequenz 1x monatlich

Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage) 24h

Spezimen
(Plasma, Serum, Harn) DNA aus humanen Zellen

Sammelperiode nicht zutreffend

Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation) 5-10ml

Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe K-EDTA Monovette

Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige) nicht zutreffend

Spezielle Präanalytik - Probentransport Probenanlieferung bei RT.
Aktuell nur Bearbeitung von Proben der Tirol Kliniken möglich (keine externen Zuweisungen).

Messbereich Die im ZIMCL etablierte und validierte Next-Generation-Sequencing Methode (Keimbahn Panel) und der Alpha Globin Strip Assay erfassen SNV und InDels in den Genen HBA1, HBA2 und HBB.

Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie) Schlechte Durchmischung des Primärprobenmaterials mit dem Antikoagulans sowie generell unzureichende Qualität und/oder Quantität des Probenmaterials.

Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch) nicht zutreffend (sequenzspezifisches Capture-Anreicherung)

Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR in house Validierung

Erklärung nach IVDR 2017/746
(für in-house Methoden) ERKLÄRUNG nach Art. 5 (5) der EU-Verordnung über In-vitro-Diagnostika (EU) 2017/746 (IVDR) zur Eigenherstellung eines IVD in Gesundheitseinrichtungen:

Wir erklären in alleiniger Verantwortung, dass das unten angeführte Produkt, welches im Wege der Eigenherstellung von uns hergestellt wird, allen Anforderungen der IVD-Verordnung (EU) 2017/746, Anhang I Grundlegende Sicherheits- und Leistungsanforderungen, entspricht, die anwendbar sind:

Das Produkt wurde in unseren eigenen Räumlichkeiten von uns in nicht industriellem Maßstab gefertigt und wird ausschließlich in unserer Gesundheitseinrichtung betrieben.

Gesundheitseinrichtung: Tirol Kliniken, Anichstr. 35, 6020 Innsbruck
Geschäftsführer: Mag. Stefan Deflorian
Leiter Qualitätsmanagement: Martin Weichselbraun, MSc.

Produktname: Massiv parallele Sequenzierung, Keimbahn Panel und Alpha Globin Strip Assay

Ort und Datum der Erstellung: Innsbruck, am: 20.04.2026

Produktklassifizierung nach Anhang VIII: Klasse: C

Ausdruck gültig am 25.05.2026

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