Beschreibung*
Bestimmung von 5-Hydroxyindolessigsäure im 24h-Harn mittels HPLC-ECD
Ziel und Zweck der Untersuchung
Die essentielle Aminosäure Tryptophan ist das Ausgangsprodukt zur Synthese von Serotonin. Die Serotoninsynthese des Organismus erfolgt zu 80% in den enterochromaffinen Zellen des Gastrointestinaltraktes. In der Zirkulation ist ein erheblicher Teil in den Thrombozyten enthalten und wird in der Leber und den Nieren zu 5-Hydroxyindolessigsäure (5-HIES) degradiert und mit dem Urin ausgeschieden. Karzinoidtumore können vermehrt Serotonin bilden, welches sowohl von den Thrombozyten verstärkt aufgenommen als auch in der Leber und den Nieren zu 5-HIES oxidativ desaminiert wird. Der Test ist in erster Linie als Hilfsmittel bei der Diagnose und Überwachung von vermuteten Karzinoiden und Serotonin-sekretierenden neuroendokrinen Tumoren bestimmt. Die alleinige Bestimmung von 5-HIES im Urin reicht möglicherweise nicht aus, um ein Karzinoid-Syndrom zu erkennen. Um die diagnostische Zuverlässigkeit zu erhöhen und das Risiko falsch negativer Ergebnisse zu minimieren, wird bei Testergebnissen im Grenzbereich und bei Patienten mit hoher klinischer Evidenz eine Mehrfachbestimmung empfohlen (Rinke A., et al., S2k-Leitlinie Neuroendokrine Tumore. Z Gastroenterol 2018; 56:583–681.)
Prinzip des Verfahrens
Nach der Neutralisation der Urinprobe erfolgt eine Aufreinigung über Ionentauscher-Säulchen mit anschließender Elution. Angesäuertes Eluat wird in das HPLC-ECD System injiziert. (Arbeitspotential: zwischen +700 mV und +850 mV)
Literatur
Labor und Diagnose (2008): Hrsg. Lothar Thomas, 7.Aufl., TH-Books
Ergebniseinheit
Einheiten(sonstige)
mg/24h
Synonyme
HIES, 5-HIES, HIAA
Analysenfrequenz
1 x pro Woche
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
1 Woche, sofern ein zweites Aliquot eingefroren wurde.
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
24h - Harn
Sammelperiode
24 Stunden
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
5 ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige)
Harnsammelgefäß der Firma Sarstedt (Uriset 24)
Spezielle Präanalytik - Probentransport
Intern: Rohrpost (Lichtschutz!) Extern: Gekühlt und lichtgeschützt versenden. Für längere Lagerung sollten die Proben tiefgefroren werden. Für weitere Informationen siehe Rundschreiben!
Messbereich
0,3 - 60 mg/l
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
keine Angaben durch den Hersteller
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
Das Vorhandensein der genannten Interferenzen kann die Genauigkeit der Testergebnisse um > 15 % beeinträchtigen. Dies kann durch chromatographische Störungen verursacht werden, die den Analyten und den internen Standard nicht gleichermaßen betreffen. 5-Methoxyindolacetat, ein Metabolit von 5-HIAA, verursacht nach ca. 80 bis 90 Minuten einen spät eluierenden Peak. Dies kann zu einer Interferenz in einem nachfolgenden chromatographischen Lauf führen. Homovanillin (3-Methoxy-4-hydroxyphenylaldehyd), eine Vorstufe von HVA, verursacht einen zusätzlichen Peak etwa 0,4 Minuten nach 5-HIAA. Homovanillin-Konzentrationen > 10 mg/L können die Genauigkeit der Testergebnisse für 5-HIAA beeinträchtigen.
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
IVDR, Risikoklasse C
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