Beschreibung*
Semiquantitative Bestimmung von Cotinin in Humanurin mittels Enzymimmunoassay (DRI).
Ziel und Zweck der Untersuchung
Dieser Assay dient zum Nachweis von Cotinin nach aktivem oder passivem Tabakkonsum. Cotinin kann nur im Zuge der Metabolisierung von Nikotin entstehen und ist somit ein zuverlässigerer Marker des Tabakkonsums als die Bestimmung von Thiocyanat oder Kohlenmonoxid. Cotinin lässt sich noch einige Tage, nachdem das Rauchen aufgegeben wurde, im Urin von Rauchern nachweisen. Ein negatives Resultat bedeutet: - Cotinin liegt nicht oder nur in einer zu geringen Konzentration vor. - Ein mehrere Tage zurückliegender Nikotinkonsum kann nicht ausgeschlossen werden Ein positives Testresultat bedeutet: - Cotinin liegt in der Probe vor, die Menge korreliert jedoch nicht unbedingt mit den psychologischen und physiologischen Effekten - sonstige kreuzreaktive Substanzen sind vorhanden
Prinzip des Verfahrens
Der Assay ist ein kompetitiver Enzymimmunoassay und beruht auf einer Konkurrenzreaktion zwischen Cotinin, das mit dem Enzym Glukose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G6PDH) markiert ist, und freiem Cotinin in der Probe um eine feste Menge Cotinin-spezifischer monoklonaler Antikörperbindungsstellen. Die Aktivität des Enzyms G6PDH wird spektrophotometrisch bei 340 nm durch Messung der Umwandlungsrate von Nikotinamidadenindinukleotid (NAD) nach NADH bestimmt.
Literatur
Assay-Packungsbeilage
Ergebniseinheit
µg/l
Einheiten(sonstige)
keine
Synonyme
keine
Analysenfrequenz
täglich, 24 Stunden
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
1 Woche
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
Spontanharn
Sammelperiode
nicht zutreffend
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
1 ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Urin Monovette
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige)
keine
Spezielle Präanalytik - Probentransport
Urin in Kunststoff oder Glasbehälter sammeln. Für den Test sollten frische, längstens 7 Tage alte Urinproben verwendet werden. Der pH-Wert der Proben muss zwischen 4 und 9 liegen.
Messbereich
300 µg/l - 2000 µg/l
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Stark trübe Proben vor der Analyse zentrifugieren.
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
Folgende strukturell VERWANDTE Stoffe zeigten bei Untersuchung mit vorliegendem Immunoassay Kreuzreaktivitäten: KREUZREAKTIVITÄT größer 50%. keine KREUZREAKTIVITÄT 10% bis 50%: keine KREUZREAKTIVITÄT 2% bis 10%: 3-OH-Cotinin 4% bei 12.5 mg/l KREUZREAKTIVITÄT 1% bis 2%: keine KREUZREAKTIVITÄT kleiner 1%: Niacinamide, Nicotin, Nicotinsäure, Nicotinsäure-N-Oxid Folgende strukturell NICHT VERWANDTE Stoffe führten bei Untersuchung mit vorliegendem Immunoassay mit den angegebenen Konzentrationen zu einem NEGATIVEN Ergebnis (500 µg/l Cut-Off Protokoll): d-Methamphetamin 100 mg/l l-Methamphetamin 100 mg/l Acetaminophen 1000 mg/l Acetylsalicylsäure 1000 mg/l Amitriptylin 50 mg/l Amphetamin 1000 mg/l Benzoylecgonin 1000 mg/l Codein 1000 mg/l Diazepam 100 mg/l Doxylamin 500 mg/l Ephedrin 1000 mg/l Harnsäure 200 mg/l Ibuprofen 500 mg/l Koffein 100 mg/l Morphin 1000 mg/l Nortriptylin 50 mg/l Oxazepam 500 mg/l Phencyclidin 500 mg/l Pheniramin 50 mg/l Phenobarbital 1000 mg/l Phenytoin 40 mg/l Primidon 50 mg/l Propoxyphen 1000 mg/l Quinidin 200 mg/l Ranitidin 500 mg/l Secobarbital 1000 mg/l Theophyllin 50 mg/l 11-Nor-Δ9-THC-9-COOH 10 mg/l Valproinsäure 150 mg/l Folgende Substanzen verursachten bei den angegebenen Konzentrationen in Urinproben KEINE Störungen des Tests: Acetaminophen 100 mg/l Aceton 1000 mg/dl Ascorbinsäure 1250 mg/dl Aspirin 100 mg/l Creatinin 500 mg/dl Ethanol 1 g/dl Galactos 10 mg/dl Gammaglobulin 500 mg/dl Glucose 3000 mg/dl Harnstoff 0.8 g/dl Hämoglobin 300 mg/dl Humanserum Albumin 500 mg/dl Ibuprofen 100 mg/l Koffein 100 mg/l Natriumchlorid 0.5 g/dl Oxalsäure 100 mg/dl Riboflavin 7.5 mg/dl pH 4-9
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
CE-IVD Zertifikat laut Beipack (2003-10)
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