Beschreibung*
Bestimmung von Vitamin C aus Lithium-Heparin Plasma mittels HPLC-UV
Ziel und Zweck der Untersuchung
Unter dem Begriff Vitamin C werden die L-(+)-Ascorbinsäure und deren Derivate mit qualitativ identischer biologischer Wirkung zusammengefasst. Aufgrund der Eigenschaft von L-Ascorbinsäure als starkes Reduktionsmittel wirkt Vitamin C als Antioxidans. Wesentliche antioxidative Funktionen sind Schutz vor freien Radikalen und reaktiven Sauerstoffspezies sowie die Verhinderung der Lipidperoxidation. Des Weiteren ist Vitamin C in der Kollagenbiosynthese, im Abbau von Tyrosin, in der Gallensäuresynthese, in der Aktivierung von neuroendokrinen Hormonen sowie in der Eisenresorption beteiligt. Ein Mangel an Vitamin C führt zu einer Fehlstruktur der Kollagene und damit zum Krankheitsbild Skorbut.
Prinzip des Verfahrens
Chromatographische Bestimmung von Vitamin C in einem isokratischen HPLC-Lauf mit UV-Detektion bei 245 nm. Durch eine effektive Proteinfällung werden störende Komponenten abgetrennt und gleichzeitig Vitamin C stabilisiert. Zur sicheren Quantifizierung wird ein stabiler interner Standard verwendet.
Literatur
Labor und Diagnose (2008): Hrsg. Lothar Thomas, 7. Aufl., TH-Books Vitamine, Spurenelemente und Mineralstoffe (2002): Hrsg. Biesalski, Thieme Verlag
Ergebniseinheit
mg/l
Einheiten(sonstige)
keine
Synonyme
L-(+)-Ascorbinsäure
Analysenfrequenz
2 x pro Woche
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
7 Tage, sofern ein 2. Aliquot bei -80°C eingefroren wurde.
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
Lithium-Heparin-Plasma
Sammelperiode
keine
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
2,7 ml Lithium-Heparin-Vollblut
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Lithium-Heparin Monovette
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige)
keine
Spezielle Präanalytik - Probentransport
Intern: Rohrpost (gekühlt) Extern: Der Zuweiser sollte die Li-Heparinprobe unmittelbar nach der Blutabnahme zentrifugieren, das Heparinplasma 2x zu je 400 µl aliquotieren (Lichtschutz!) und bei -20°C einfrieren. Die eingefrorenen Aliquote müssen gefroren versendet werden! Spezimen Vorbereitung: Zentrifugation 12 min ca. 2100G (14+/-5°C). Nach der Zentrifugation 2 x 400 µl Plasma abheben und bei -20°C tieffrieren.
Messbereich
0,4 – 100 mg/L
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Acetylcystein verursacht in der maximalen therapeutischen Konzentration durch Störung des internen Standards um etwa 30% zu niedrige Vitamin C Konzentrationen. Diese Störung ist durch das Auftreten eines zweiten Peaks vor dem internen Standard zu erkennen.
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
nicht zutreffend
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
CE Zertifikat der Firma Chromsystems (München)
Für die zur Verfügung gestellten Informationen kann keinerlei Gewähr im Hinblick auf Aktualität, Korrektheit, Vollständigkeit oder Qualität übernommen werden. Haftungsansprüche, welche sich auf Schäden materieller oder ideeller Art beziehen, die durch die Nutzung oder Nichtnutzung der dargebotenen Informationen bzw. durch die Nutzung fehlerhafter und unvollständiger Informationen verursacht wurden, sind ausgeschlossen. Die Verwendung und Nutzung der Zusammenstellungen liegt daher alleine im Verantwortungsbereich des Anwenders/der Anwenderin, welche(r) das ZIMCL/tirol kliniken gegenüber Ansprüchen Dritter schad- und klaglos halten wird.