Beschreibung*
Immunologischer in vitro Test zur quantitativen Bestimmung von Thyreoperoxidase Antikörper in Humanserum
Ziel und Zweck der Untersuchung
Thyreoidea-spezifische Peroxidase (TPO) befindet sich auf den Mikrosomen von Thyreozyten und wird an deren apikaler Zelloberfläche exprimiert. TPO ist ein potentielles Autoantigen. Bei vielen auf Autoimmunität beruhenden Thyreoditiden werden erhöhte Serumtiter von Antikörpern gegen TPO gefunden (in bis zu 90 % bei chronischer Hashimoto Thyreoiditis, in 70 % bei Morbus Basedow).
Prinzip des Verfahrens
ElektroChemiLumineszenz ImmunoAssay (ECLIA) nach dem Kompetitionsprinzip: • 1.Inkubation: 20 μl Probe und der mit Ruthenium-Komplex markierte polyklonaler anti-TPO-Antikörper (Schaf) werden inkubiert. • 2.Inkubation: nach Zugabe von biotinyliertem TPO (rekombinant) und mit Streptavidin-beschichteten Mikropartikeln konkurrieren die anti-TPO Antikörper der Probe und die mit Ruthenium markierten anti-TPO Antikörper um das biotinylierte TPO-Antigen. Der Gesamtkomplex wird über die Biotin-Streptavidin-Wechselwirkung an die Festphase gebunden. • Das Reaktionsgemisch wird in die Messzelle überführt, wo die Mikropartikel durch magnetische Wirkung auf die Oberfläche der Elektrode fixiert werden. Danach werden mit ProCell/ProCell M die ungebundenen Substanzen entfernt. Durch Anlegen einer Spannung wird die Chemilumineszenzemission induziert und mit dem Photomultiplier gemessen. • Die Ergebnisse werden anhand einer Kalibrationskurve ermittelt. Diese wird durch eine 2-Punkt-Kalibration und eine über den Reagenzbarcode mitgelieferte Masterkurve gerätespezifisch generiert.
Literatur
[1] Thomas L. Labor und Diagnose. [2] Packungsbeilage [3] Hotze & Schumm-Draeger, Schilddrüsen-Krankheiten, 5.Auflage (2003)
Ergebniseinheit
Einheiten(sonstige)
kU/l
Synonyme
TPO Antikörper, MAK, mikrosomale Antikörper
Analysenfrequenz
werktags
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
7 Tage
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
Serum
Sammelperiode
nicht zutreffend
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
1 ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Serum Monovette
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige)
keine
Spezielle Präanalytik - Probentransport
- Venenpunktion - Bei Patienten unter Therapie mit hohen Biotin-Dosen (> 5 mg/Tag) sollte die Probenentnahme mindestens 8 Stunden nach der letzten Applikation erfolgen. INTERN: Transport über Rohrpost EXTERN: abzentrifugiertes Serum muss spätestens 3 Tage nach Blutabnahme am ZIMCL eintreffen. Die Proben gekühlt 2-8 °C versenden. Für längere Lagerung sollten die Proben tiefgefroren werden, nur 1x einfrieren.
Messbereich
15 - 600 kU/l
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Der Test wird nicht beeinflusst durch Ikterus (Bilirubin ≤ 66 mg/dl), Hämolyse (Hb ≤ 0.24 g/dl), Lipämie (Triglyceride ≤ 2100 mg/dl) und Biotin (≤ 40.9 nmol/l bzw. ≤ 10 µg/l). Bewertung: Wiederfindung ± 10 % vom Ausgangswert. Bei Patienten unter Therapie mit hohen Biotin-Dosen (> 5 mg/Tag) sollte die Probenentnahme mindestens 8 Stunden nach der letzten Applikation erfolgen. Es wurden keine Einflüsse durch Rheumafaktoren bis zu einer Konzentration von 450 kU/l beobachtet. In In‑vitro‑Studien verursachte das Medikament Itraconazol in therapeutischer Tagesdosis erhöhte Anti‑TPO-Konzentrationen. In seltenen Einzelfällen können Störungen durch extrem hohe Titer von Antikörpern gegen Analyt-spezifische Antikörper, Streptavidin sowie Ruthenium auftreten.
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
keine Angabe des Reagenzienherstellers
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
CE-IVD Zertifikat
Für die zur Verfügung gestellten Informationen kann keinerlei Gewähr im Hinblick auf Aktualität, Korrektheit, Vollständigkeit oder Qualität übernommen werden. Haftungsansprüche, welche sich auf Schäden materieller oder ideeller Art beziehen, die durch die Nutzung oder Nichtnutzung der dargebotenen Informationen bzw. durch die Nutzung fehlerhafter und unvollständiger Informationen verursacht wurden, sind ausgeschlossen. Die Verwendung und Nutzung der Zusammenstellungen liegt daher alleine im Verantwortungsbereich des Anwenders/der Anwenderin, welche(r) das ZIMCL/tirol kliniken gegenüber Ansprüchen Dritter schad- und klaglos halten wird.