Parameterdetails

Parametername: Cytochrom P450 Isoenzym 3A4/3A5 Genotypisierung

Version: 2 Gültig ab 12.12.2024

Beschreibung* Genotypisierung von Cytochrom P450 Isoenzym 3A4 *22 und 3A5*3 aus Vollblut mittels PCR und Schmelzkurvenanalyse.

Ziel und Zweck der Untersuchung CYP3A5 und dessen Isoenzym 3A4 weisen eine große strukturelle Verwandtschaft sowie ein ähnliches Substratspektrum auf und sind zwei der wichtigsten Enzyme der Cytochrom P450-Enzymfamilie. Sie sind an der Verstoffwechslung einer Vielzahl von endogenen und exogenen Substanzen (endogene Steroide, Toxine, Immunsuppressiva wie Tacrolimus oder Cyclosporin uva) beteiligt. Polymorphismen im CYP3A5-oder -3A4 Gen können zu einer erniedrigten Enzymaktivität und Substrat-Metabolisierung führen und in der Folge eine Dosisanpassung notwendig machen.
Der CYP3A5 Wildtyp (CYP3A5*1), welcher mit einer normalen Enzymaktivität einhergeht, kommt bei Kaukasiern nur bei rund 15% vor. Ca. 80% der Kaukasier weisen dagegen homozygot die Variante CYP3A5*3 (rs35599367, G6986A bzw. NG_008421.1:g.20493C>T) auf, welche einen vorzeitigen Abbruch der CYP3A5-Proteinsynthese bewirkt und dazu führt, dass Personen mit diesem (homozygotem CYP3A5*3) Genotyp keine CYP3A5-Enzymaktivität aufweisen. Da der homozygote Genotyp bei Kaukasiern so häufig vorkommt, wird in der Regel bei der Standarddosierung von einer fehlenden CYP3A5 Aktivität ausgegangen. Patienten mit mindestens einem Wildtyp-Allel benötigen hingegen höhere Medikamenten-Dosen (z.B. von Tacrolimus) für die gewünschte Wirkung. Andernfalls kann durch die allgemein übliche Dosierung nicht der gewünschte immunsuppressive Effekt erzielt werden (Kuehl et al., Nat Genet. 2001 Apr; 27(4): 383-91).
Der CYP3A4 Wildtyp (CYP3A4*1), welcher zu einer normalen Enzymaktivität führt, kommt bei Kaukasiern mit einer Prävalenz von 90-95% vor. Ca. 3-5% der Kaukasier weisen den CYP3A4*22-Polymorphismus (rs776746, NG_007938.2:g.12083A>G) auf. Diese Variante geht in mehreren Studien mit einem reduzierten Tacrolimus-Metabolismus bzw. mit erhöhten Tacrolimus-Wirkstoffspiegeln einher.

Die CYP3A5/A4-Genotypisierung ist indiziert bei Patienten vor Beginn einer Therapie mit Tacrolimus oder CyclosporinA zur schnelleren Erreichung eines stabilen Wirkstoff-Spiegels sowie bei klinischen Anzeichen einer Überdosierung oder Unterdosierung eines anderen über CYP3A4/A5 verstoffwechselten Medikamentes.

Prinzip des Verfahrens PCR mit Schmelzkurvenanalyse für die CYP3A4 Variante *22 NG_008421.1:g.20493C>T (rs35599367) und CYP3A5*3 Variante *3 NG_007938.2:g.12083A>G (rs776746)

Literatur • van Schaik et al. “CYP3A5 variant allele frequencies in Dutch Caucasians.” Clin Chem. 2002 Oct;48(10):1668-71.
• H de jonge “In Vivo CYP3A4 Activity, CYP3A5 Genotype, and Hematocrit Predict Tracolimus Dose Requirements and Clearance in Renal Transplant Patients” Clinical Pharmacology & Therapeutiks, advance online publication 08/2012 doi:10.1038/clpt.2012.109
• D. Hesselink et al. “Genetic Polymorphism of the CYP3A4 / A5 / MDR-1 genes and pharmakokinetics oft he calcineurin inhibitor cyclosporin and tacrolimus“ Clinical Pharmacology & Therapeutiks, 2003, 0009-9236
• J. Ekbal et al. „Pharmacogenetics of immunosuppressive drugs: prospect of individual therapy for transplant patients.” Pharmacogenomics (2008), 9(5), 585-596
• L. ElensM R. R. Bouamar et al.; “A New Functional CYP3A4 Intron 6 Polymorphiosm Significantly Affects Tacrolimus Pharmacokinetics in Kidney Transplant Recipients” Clinical Chemistry 57:11, 1574-1583 (2011)
• Becquemont et al. Practical recommendations for pharmacogenomics-based prescription: 2010 ESF-UB Conference on Pharmacogenetics and Pharmacogenomics. Pharmacogenomics. 2011 Jan;12(1):113-24.

Ergebniseinheit

Einheiten(sonstige) qualitative Analyse

Synonyme Arzneimittelnebenwirkung
CYP3A4/A5 Genotypisierung
Pharmakogenetik
Tacrolimus
Sirolimus
Cyclosporin

Analysenfrequenz bei Bedarf

Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage) 72 Stunden

Spezimen
(Plasma, Serum, Harn) EDTA-Vollblut

Sammelperiode nicht zutreffend

Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation) 1 ml

Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe K-EDTA Monovette

Spezielle Präanalytik - Probentransport Für die CYP3A4/A5-Genotypisierung (Pharmakogenetik) ist derzeit KEINE Einverständniserklärung erforderlich.
Probenanlieferung bei 2-8°C, nicht frieren, nicht aliquotieren. Keine Annahme von Sekundärröhrchen! Laut Beschluss der österreichischen Genttechnikkommission vom 4.12.2009 gilt für pharmakogenetische Untersuchungen folgende Regelung: Sollte ein im Zuge einer pharmakogenetischen Untersuchung analysierter Polymorphismus auch Aussagen i.S.d. §65 Abs.1 Z3 und 4 GTG über die Veranlagung für eine möglicherweise künftig ausbrechende genetisch bedingte Erkrankung zulassen, so ist die Untersuchung dieses Polymorphismus antragspflichtig i.S.d. §68 Abs.2 GTG.

Messbereich CYP 3A4 Variante *22 (g. 20493C>T, rs35599367), CYP3A5 Variante *3 (g.12083A>G rs776746)

Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie) • Heparin als Antikoagulans
• Unzureichende Qualität und/oder Quantität des Probenmaterials

Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch) nicht zutreffend

Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR in-house validierter RUO-Assay

Erklärung nach IVDR 2017/746
(für in-house Methoden) ERKLÄRUNG nach Art. 5 (5) der EU-Verordnung über In-vitro-Diagnostika (EU) 2017/746 (IVDR) zur Eigenherstellung eines IVD in Gesundheitseinrichtungen:

Wir erklären in alleiniger Verantwortung, dass das unten angeführte Produkt, welches im Wege der Eigenherstellung von uns hergestellt wird, allen Anforderungen der IVD-Verordnung (EU) 2017/746, Anhang I Grundlegende Sicherheits- und Leistungsanforderungen, entspricht, die anwendbar sind:

Das Produkt wurde in unseren eigenen Räumlichkeiten von uns in nicht industriellem Maßstab gefertigt und wird ausschließlich in unserer Gesundheitseinrichtung betrieben.

Gesundheitseinrichtung: Tirol Kliniken, Anichstr. 35, 6020 Innsbruck
Geschäftsführer: Mag. Stefan Deflorian
Leiter Qualitätsmanagement: Martin Weichselbraun, MSc.

Produktname: Cytochrom P450 Isoenzym 3A4/3A5 Genotypisierung

Ort und Datum der Erstellung: Innsbruck, am: 20.11.2023

Produktklassifizierung nach Anhang VIII: Klasse: C

Ausdruck gültig am 11.07.2025

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