Beschreibung*
Bestimmung von Osteoprotegerin in humanem Serum mittels ELISA
Ziel und Zweck der Untersuchung
Osteoprotegerin (OPG) oder Osteoclast inhibitory factor (OCIF) ist ein negativer Regulator der Knochenresorption und wird von vielen verschiedenen Geweben und Zelltypen, einschließlich Osteoblasten, produziert. OPG wirkt, indem es als Decoy Rezeptor für RANKL fungiert und dadurch dessen Funktion in der Osteoklastogenese neutralisiert. Außerdem ist es an der Regulation der Gefäßverkalkung beteiligt. OPG ist ein Glykoprotein und gehört zur Superfamilie der TNF Rezeptor Superfamilie 11b (Gen Name TNFRSF11B). Es wird als Monomer von 380 Aminosäuren synthetisiert, als Homodimer in der Zelle zusammengesetzt, und anschließend hauptsächlich als Disulfid-verknüpftes Homodimer in den extrazellulären Raum sezerniert. Die Bestimmung der OPG-Spiegel ist sinnvoll bei Osteoporose, Krankheiten mit lokal induzierter Knochenresorptionsaktivität, Arthritis, kardiovaskulären Krankheiten sowie zur Überwachung von Therapien mit Glucocorticoiden und Insulin-Sensitizern.
Prinzip des Verfahrens
Der im ZIMCL eingesetzte ELISA ist ein Enzymimmunoassay (Sandwich ELISA) zur direkten quantitativen Bestimmung von Osteoprotegerin. In mit anti-Osteoprotegerin-Antikörpern beschichteten Mikrotiter-Streifen wird das in Proben, Kontrollen und Standards enthaltene Osteoprotegerin gebunden. An das gebundene Antigen bindet ein sekundärer Enzym-markierter Antikörper, der ein Substrat umsetzt. Die nach der Substratreaktion bei 450nm gemessene optische Dichte (OD) ist proportional zur Osteoprotegerin-Konzentration. Die unbekannten Proben werden anhand einer Standardkurve ausgewertet.
Literatur
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Ergebniseinheit
pmol/l
Synonyme
osteoclastogenesis inhibitory factor (OCIF) tumor necrosis factor receptor superfamily member 11B (TNFRSF11B) TNFRSF11B OCIF
Analysenfrequenz
bei Anforderung
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
72h
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
Serum
Sammelperiode
nicht zutreffend
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
1ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
Serum Monovette
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige)
nicht zutreffend
Spezielle Präanalytik - Probentransport
Intern: keine spezielle Präanalytik erforderlich Externe Einsender: mindestens 1ml Serum (Zentrifugation zumindest 20min bei 2000g), bei 2-8°C transportieren. Bei Transportzeiten >24h muss der Transport der Serumproben gefroren erfolgen.
Messbereich
0,08 - 20 pmol/l (höchster Standard; höher konzentrierte Proben müssen mit mit STD1 verdünnt werden)
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Lipämische und hämolytische Proben können falsche Ergebnisse liefern (keine genauen Herstellerangaben).
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
keine Herstellerangaben
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
CE-IVD
Erklärung nach IVDR 2017/746
((für in-house Methoden))
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