Beschreibung*
Quantitative Bestimmung von Vasoaktivem Intestinalem Peptid (VIP) im Plasma durch Radioimmunoassay (RIA).
Ziel und Zweck der Untersuchung
VIP ist eine aus 28 Aminosäuren bestehende Zusammensetzung, die ursprünglich aus dem Dünndarm des Schweins extrahiert wurde. VIP ist im gesamten Gastrointestinaltrakt sehr verbreitet, dass die Gewebekonzentrationen von VIP höher sind als bei anderen Darmpeptiden. Zu den peripheren-Auswirkungen von VIP im Darm zählen ein erhöhter alkalischer Sekretfluss aus dem Pankreas, die Hemmung der Magensäureproduktion, die Stimulation der Insulinfreisetzung6,Hyperglykämie infolge von Glykogenolyse, die Stimulation des Dünndarmsekret flusses sowie ein erhöhter Gehalt von zyklischem Adenosinmonophosphat (cAMP) im Darm. Außerdem wird VIP in hoher Konzentration im gesamten zentralen Nervensystem gefunden, wo es eine starke vasodilatorische und hypotone Wirkung auf das kardiovaskuläre System hat, sowie im respiratorischen System, wo es die Bronchodilatation beeinflusst und die Beatmung verbessert.
Prinzip des Verfahrens
VIP wird durch einen Radioimmunoassay gemessen, bei dem durch verzögerte Tracer-Zugabe die Empfindlichkeit erhöht wird. Probe und Kaninchen-anti-VIP werden hinzugegeben, gefolgt von einer 24-stündigen Inkubation bei 2-8°C. Anschließend wird 125-I-VIP hinzugegeben, gefolgt von einer zweiten 24-stündigen Inkubation bei 2-8°C. Ein zuvor präzipitierter Träger, ein zweiter Antikörper und Polyethylenglykol werden in einem einzigen Schritt hinzugegeben. Der Test kann nach mindestens 2 Stunden Inkubation bei 2-8°C zentrifugiert und dekantiert werden.
Literatur
Fahrenkrug et al. Radioimmunoassay of vasoactive intestinal polypeptide (VIP) in plasma. J Lab Clin Med. 1977 Jun;89(6):1379-88. Fahrenkrug. Evidence for common precursors but differential processing of VIP and PHM in VIP-producing tumors. Peptides. 1985 May-Jun;6(3):357-61. Bloom et al. Diarrhoea in vipoma patients associated with cosecretion of a second active peptide (peptide histidine isoleucine) explained by single coding gene. Lancet. 1983 Nov 19;2(8360):1163-5.
Ergebniseinheit
ng/l
Einheiten(sonstige)
nicht zutreffend
Synonyme
Vasoaktives Intestinales Peptid, VIP
Analysenfrequenz
nach Bedarf
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
nicht zutreffend (spezielles Spezimen)
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
EDTA-Plasma mit Aprotinin
Sammelperiode
nicht zutreffend
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
1 ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
K-EDTA Monovette
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige)
Aprotininhaltiges EDTA-Plasma
Spezielle Präanalytik - Probentransport
Bei der anfänglichen Probengewinnung für VIP muss EDTA- und aprotininhaltiges Plasma verwendet werden. Das Blut in einem evakuierten Glasröhrchen für 5 oder 10 ml unter Verwendung von EDTA als Antikoagulationsmittel abnehmen. Aprotinin muss im Sammelröhrchen enthalten sein, um einen Abbau des VIP in den Proben zu vermeiden. Das Probenröhrchen muss vor- und nach der Abnahme im Eisbad gekühlt und binnen einer Stunde zentrifugiert und aliqotiert werden!!! Extern: Die Proben unverzüglich 15 Minuten lang bei 760 x g* zentrifugieren, um hämolysefreies Plasma zu erhalten. Das Plasma von den Zellen trennen und in (vorzugsweise Glas-)Röhrchen füllen und auf mindestens -18°C tieffrieren. Proben dürfen nicht wiederholt eingefroren und aufgetaut werden. - Postversand: abgesert und tiefgefroren (-4 bis -15°C)
Messbereich
9 bis 361 ng/l (=3 bis 120 pmol/l)
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Plasmaproteasen zerstören VIP sehr rasch, daher Abnahme in Aprotinin hältigem EDTA-Röhrchen erforderlich. Rascher Transport ins ZIMCL. Von extern: Probe gekühlt versenden.
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
Polypeptid: Kreuzreaktivität in % VIP 1-28: 100 VIP 1-6: <2,5 VIP 1-18: <2,5 VIP 1-22: <2,5 VIP 11-28: 83,3 VIP 7-28: 90,9 VIP 18-28: 71,4 Sekretin, Schwein: <0,01 GIP, Schwein: <0,01 Pankreas-Glukagon, Schwein: <0,01 Enteroglukagon, Schwein: <0,01 Pankreatisches Polypeptid, Mensch: <0,01 Substanz P: <0,01 Somatostatin, Schaf: <0,01
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
CE-IVD Zertifikat
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