Beschreibung*
Quantitative Bestimmung von ACTH in humanem Plasma mittels Chemilumineszenz-Immunoassay.
Ziel und Zweck der Untersuchung
Das Adrenocorticotrope Hormon (ACTH) ist ein 4,5 kD großes Polypeptidhormon, welches im Hypophysen-Vorderlappen unter Einfluss des vom Hypothalamus sezernierten "Corticotropin Releasing Factor" (CRF) produziert wird. Es stimuliert die Sekretion von Steroiden (insbesondere Cortisol) in der Nebennierenrinde (NNR) und ist dadurch essentiell in der Regulation von Wasser- und Elektrolytstoffwechsel, Wachstum und einigen Stoffwechselvorgängen. Über einen negativen Feedback Mechanismus wird die ACTH Ausschüttung durch das Steroid Cortisol reguliert. Die ACTH Bestimmung ist hilfreich in der Differentialdiagnose von NNR-Insuffizienz und Überfunktion. Hohe Werte sind typisch bei einer primären NNR-Insuffizienz (Mb. Addison). Bei einer sekundären NNR-Insuffizienz (hypophysäre Störung) sind die ACTH Werte dagegen erniedrigt. Die ACTH Bestimmung ist weiters bei der differentialdiagnostischen Abklärung einer Cortisol Überproduktion (Mb. Cushing) sinnvoll. Erniedrigte Werte findet man beim primären Cushing-Syndrom, Läsionen / Hyperplasie der NNR, Hypophysenlappen- oder hypothalamischer Insuffienz. Erhöhte Werte weisen auf Stress, Anstrengung, ektopische ACTH-Produktion (zB paraneoplastisch beim kleinzelligen Bronchial-Ca) oder Überproduktion in der Hypophyse hin (Hypophysenadenom). Die ACTH-Werte im Plasma zeigen eine ausgeprägte Tagesrhythmik. Daher ist die Standaridiserung der Abnahmezeit wichtig. Referenzbereichsangaben sind in der Regel auf eine Abnahmezeit von 9:00 Uhr morgens bezogen. Das ACTH Analogon Synacthen findet Verwendung beim ACTH (Synacthen) Stimulationstest mit anschließender Bestimmung von Cortisol im Serum bei V.a. NNR-Insuffizienz oder Steroidbiosynthesedefekte (zB late-onset AGS, 21-Hydroxylasemangel). Beim alternativen CRH-Stimulationstest erfolgt die Stimulation bereits auf hypothalamischer Ebene mit anschließender Bestimmung von ACTH und Cortisol.
Prinzip des Verfahrens
Festphasen-, sequenzieller Zweischritt-, Chemilumineszenz-, immunometrischer Assay. Die Patientenprobe wird mit an Kugeln gebundenen monoklonalen Anti ACTH Maus-Antikörper inkubiert. Ein zweiter Kaninchen Anti ACTH Antikörper, welcher an alkalische Phosphatase konjugiert ist, wird hinzugegeben. Die Probe bildet dadurch einen an die Kugeln gebundenen Antikörper-Sandwich-Komplex. Nach einem Waschschritt wird ein Substrat zugegeben . Das Substrat wird durch die alkalische Phosphatase hydrolysiert, sodass ein instabiles Zwischenprodukt entsteht, welches eine Lichtemission erzeugt. Die Menge der Lichtemission ist direkt proportional zur enthaltenen Konzentration an ACTH in der Probe. Inkubationszyklen: 2 × 30 Minuten
Literatur
Fa. Siemens ACTH - Packungsbeilage Immulite 2000 xpi Operators Guide Broughton A. Application of adrenocorticotropin assays in a routine clinical laboratory. Am J Clin Path 1975;64:618-24. Cizza G, Chrousos GP. Adrenocorticotrophic hormone-dependent Cushing's Syndrome. Cancer Treat Res 1997;89:25-40. Oemers et al. Function of the adrenal cortex. ln: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. Philadelphia: WB Saunders, 1999: 1530-69. Oonald RA. ACTH and related peptides. Clin Endocrinol1980;12:491-524. Findling et al. Selective venous sampling for ACTH in Cushing's syndrome, Ann Intern Med 1981;94:647-52.
Ergebniseinheit
ng/l
Einheiten(sonstige)
keine
Synonyme
Adrenocorticotropes Hormon
Analysenfrequenz
Montag bis Freitag
Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage)
24 Stunden, sofern die Probe bei 2–8°C gelagert wurde.
Spezimen
(Plasma, Serum, Harn)
EDTA-Plasma
Sammelperiode
keine
Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation)
1 ml
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe
K-EDTA Monovette
Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige)
kein
Spezielle Präanalytik - Probentransport
- Venenpunktion - Hämolyse vermeiden! Der Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zur Klärung von lipämischen Proben empfohlen. INTERN: Transport über Rohrpost EXTERN: Plasma abheben, muss spätestens 24 Stunden nach Blutabnahme am ZIMCL eintreffen. Die Probe gekühlt bei 2 - 8°C versenden!
Messbereich
5 bis 1.250 ng/l
Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie)
Bilirubin: Konjugiertes und unkonjugiertes Bilirubin hat in Konzentrationen bis zu 200 mg/l keinen Einfluss auf die Messung, der größer als die Impräzision des Assays selbst ist. Hämolyse: Hämoglobin hat in Konzentrationen bis zu 512 mg/dl keinen Einfluss auf die Ergebnisse, der größer als die Impräzision des Assays selbst ist. Lipämie: Triglyceride hat in Konzentrationen bis zu 5 000 mg/dl keinen Einfluss auf die Ergebnisse, der größer als die Impräzision des Assays selbst ist. Größere Biotin-Konzentrationen als 1500 ng/ml können zu falschen Ergebnissen bei Patientenproben führen.
Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch)
ACTH (1,24) 1%. ACTH (18,39) 17,3%. Eine Kreuzreaktivität gegenüber anderen Steroidmetaboliten kann nicht vollständig ausgeschlossen werden. Heterophile Antikörper in Humanseren können mit Immunglobulinen aus den Assaykomponente (polyklonal, Kaninchen) reagieren und Interferenzerscheinungen innerhalb des in vitro Immunoassays verursachen.
Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR
CE-IVD Zertifikat
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