Parameterdetails

Parametername: Flowzytometrie, CD34+ Stammzellquantifizierung

Version: 4 Gültig ab 26.02.2025

Beschreibung* Quantifizierung von vitalen, CD34-positiven Stammzellen im peripheren Blut, Knochenmark oder autologen bzw. allogenen Apheresaten mittels Durchflusszytometrie

Ziel und Zweck der Untersuchung Quantifizierung von vitalen CD34+ Stammzellen im Rahmen der Vorbereitung und Durchführung von autologer bzw. allogener Stammzelltransplantation.

Die Analyse umfasst die Marker CD45, CD34 und den Vitalfarbstoff 7-AAD.

Prinzip des Verfahrens Analyse von Einzelzellen in Suspension auf Grundlage von Streulicht- und Fluoreszenzeigenschaften. Antigene (sogenannte CD-Marker = cluster of differentiation) an der Zelloberfläche und im Zellinneren werden durch fluoreszierende Antikörper markiert, durch einen Hüllstrom (Sheath Flüssigkeit) fokussiert und als Einzelzellen an einer Lichtquelle (Laser) vorbeigeführt. Die dadurch emittierten Lichtsignale werden mit Hilfe verschiedener Photomultiplier (PMTs) in elektronische Signale umgewandelt und als Messdaten gespeichert. Zusätzlich wird die Streuung des Anregungslichtes als Forward Scatter (FSC; entspricht der Größe der Zelle) und Side Scatter (SSC; entspricht in etwa der Granularität und Struktur der Zelle) gemessen.
An den im ZIMCL eingesetzten Flowzytometern können durch drei verschieden Laser (488nm (blau), 640nm (rot), 405nm (violett)) 12 verschiedene Fluorochrome angeregt werden.
Durch die Analyse einer Vielzahl von Zellen können bei der anschließenden Auswertung der Daten verschiedene Zellpopulationen definiert werden. Aus Vollblut, Knochenmarkaspiraten und Apheresaten werden die CD34+ Stammzellen relativ zu den Gesamtleukozyten quantifiziert. Die absolute Quantifizierung von CD34+ Stammzellen erfolgt mittels Single Platform Methode unter Verwendung von Kalibrationspartikeln.

Literatur s. Anhang

Ergebniseinheit %

Einheiten(sonstige) Absolut-Resultate: Zellen/µl; Relativ-Resultate: % der Gesamtleukozyten

Synonyme FACS-Analyse; Immunologische Zelltypisierung; Immunphänotypisierung
Stammzellmessung
Apheresat

Analysenfrequenz täglich, außer Wochenende

Nachforderungsmöglichkeit der Analyse
(Stunden, Tage) 24 h

Spezimen
(Plasma, Serum, Harn) Nativblut mit K-EDTA, Knochenmark-Aspirat, Apheresate

Sammelperiode nicht zutreffend

Mindestvolumen pro Anforderung vor Zentrifugation
(vor Zentrifugation) 500 µl

Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe K-EDTA Monovette

Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe(sonstige) Knochenmark-Spritze mit Heparin, Apheresate mit div. Additivlösungen

Spezielle Präanalytik - Probentransport - Für Analysen aus peripherem Blut: Venenpunktion oder kapilläre Abnahme; Transport über Rohrpost bzw. Postversand bei Raumtemperatur
- Für Analysen aus Knochenmark: Knochenmarkpunktion; Transport durch BMA bzw. Postversand bei Raumtemperatur
- Für Analysen aus Apheresat: Transport über Rohrpost

Messbereich analytischer Messbereich: 1 - 1000 viable CD34+ cells/µl

Allgemeine Störungen
(z.B. Lipämie, Hämolyse, Bilirubinämie) Normoblasten; Makroplättchen; Megakaryozyten; Lyse-resistente Erythrozyten;
geronnene oder hämolysierte Probe

Kreuzreaktionen
(z.B. immunologisch) unspezifische Bindung der Antikörper möglich, oft patientenspezifisch
keine Interferenzen bei folgenden Analyten: Albumin, Bilirubin, Cyclophosphamide, Hämoglobin, Doxorubicin, G-CSF, Intralipid, Paclitaxel (Konzentrationen siehe Packungsbeilage)

Kennzeichnung des Analyse-Verfahrens nach MPG / IVDR Analyse-Gerät, Reagenzien und Antikörper CE-IVD- bzw. CE-IVDR zertifiziert

Erklärung nach IVDR 2017/746
(für in-house Methoden) nicht zutreffend

Produktname: Flowzytometrie, CD34+ Stammzellquantifizierung

Ausdruck gültig am 28.03.2025

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